HiScript II One Step RT-PCR Kit

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- 50 rxns（50 μl/rxn）

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HiScript II One Step RT-PCR Kit

一步法高效RT-PCR 试剂盒

病毒检测；基因表达分析；终点法PCR检测

· 逆转录和PCR 在同一管内进行

· 检测灵敏度可达1 pg 总RNA

· 可扩增超过10 kb 的长片段

图1

A. 以Hela细胞总RNA为模板，用HiScript II One Step RT-PCR Kit (P611) 扩增555 bp GAPDH片段。检测灵敏度可达到0.1 pg。

B. 以猪蓝耳病毒PRRSV RNA为模板，用HiScript II One Step RT-PCR Kit (P611) 扩增660 bp片段。检测灵敏度可达到0.2 TCID50。

C. 以1 μg Hela细胞总RNA为模板，用HiScript II One Step RT-PCR Kit (P611)扩增不同长度的片段。可成功扩增长达12.1 kb的UTRN片段。

本试剂盒专为以RNA 为模板( 如RNA 病毒) 的终点法PCR 检测而设计。使用基因特异引物(GSP)，逆转录和PCR 反应在一管内完成，不需要额外的开管/ 移液操作，大大提高了检测通量，并降低了污染的风险。整合HiScript II Reverse Transcriptase以及Champagne Taq DNA Polymerase 的优越性能，配合经过优化的缓冲体系，HiScript II One Step RT-PCR Kit 可扩增片段长达10 kb 以上。试剂盒以便捷的Master Mix 形式提供。2 × One Step Mix 包含优化的缓冲体系和dNTPs；One Step Enzyme Mix 包含比例优化的HiScript II Reverse Transcriptase、RNase inhibitor 以及Champagne Taq plus DNA Polymerase，操作简单快捷。

-30 ~ -15℃保存。

无

HiScript II One Step RT-PCR Kit (Dye Plus)

Q1：一步法与两步法进行RT-PCR的区别？

A1：一步法即逆转录、PCR扩增在同一管内进行，不需要额外的开管、移液操作，大大提高了检测通量，并降低了污染的风险。由于得到的所有cDNA样品都用来扩增，所以灵敏度更高，可以达到1 pg总RNA。一步法使用基因特异性引物（GSP）合成cDNA，所以投入什么引物就逆转出相应的cDNA产物，得不到中间产物cDNA。更适用于特定基因的检测、较少的组织样本、具有大量模板待检测等情况。

两步法即逆转录和PCR扩增分两步进行，首先从RNA模板逆转录得到cDNA，得到的cDNA再进行一次或多次不同的PCR反应。两步法可以使用通用型逆转录(oligo dT或随机引物)引导cDNA第一链合成，后续实验可以进行多个基因的检测。

无

HiScript II One Step RT-PCR Kit (Dye Plus)

HiScript II One Step RT-PCR Kit-P611说明书-V22.1

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无

HiScript II One Step RT-PCR Kit (Dye Plus)