2 × Rapid Taq Master Mix

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2 × Rapid Taq Master Mix

速度与性能，并驾齐驱

菌落PCR；快速PCR；基因型鉴定

· 扩增速度快：15 sec/kb，1 kb 以内扩增速度可达1 sec/kb

· 操作便捷：加入引物和模板即可进行扩增，无需冰上操作，产物含有染料可直接进行电泳

· 稳定性好：反复冻融50 次，活性未见明显降低

图1.扩增速度可达1 sec/kb

以人基因组DNA、人cDNA、鼠基因组DNA、小麦基因组DNA、水稻基因组DNA、菌液、菌落、λDNA 分别为模板扩增1-2 kb 片段，延伸时间仅设置为1 sec/kb，PCR 反应结束后取10 ul 进行电泳检测。

图2.扩增特异性强，产量高

以人基因组和水稻基因组DNA为模板，分别扩增长度为2 kb、3.3 kb 的目的片段，延伸时间分别设置为30 s、60 s，PCR 反应结束后取10 ul 进行电泳检测。可见2 × Rapid Taq Master Mix 具有优异的扩增性能、高特异性和产量优势。

本品扩增性能优，保存稳定性高，扩增速度可达15 sec/kb，适用于快速PCR反应，1 kb以内的扩增速度可达1 sec/kb。只需加入引物和模板即可进行扩增，减少了移液操作，提高了检测通量和结果的重现性。扩增体系反复冻融后仍可保持稳定活性。本品含有电泳缓冲液和绿色Loading Buffer，可在反应结束后直接进行电泳，使用方便。PCR产物的3’端带A，可直接克隆至T载体。

组分	P222-01	P222-02	P222-03	P222-04
2 × Rapid Taq Master Mix	5 × 1 ml	15 × 1 ml	50 × 1 ml	10 × 5 ml

-20℃保存；解冻后4℃可存放3个月。

无

Q1：扩增效率低，实验组无扩增条带。

A1：(1) 引物

检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解；引物设计是否合理，可利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物。

(2) 模板

长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；模板GC含量过高会导致DNA的双链无法打开，此时加入PCR Enhancer（货号P021），可以有效降低解链温度；模板的GC含量过低会导致扩增效率较差，可适当延长引物长度或通过梯度PCR摸索合适的反应条件；模板中存在抑制物，特别是甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，会造成DNA脱嘌呤而影响PCR结果，建议稀释使用或重新制备；若模板为cDNA，要确认逆转录所用RNA的纯度及完整度。

(3) 酶

反应所用的酶因保存或运输不当而失活，建议更换新酶或用另一来源的酶重新实验。

(4) 扩增体系

反应体系配制错误，建议重复实验。

(5) 反应程序

检查变性温度是否准确，PCR仪指示温度与实际温度是否相符。如果温度过高，酶在前几个循环就迅速失活；温度过低则模板变性不彻底。可对退火温度设置梯度，摸索合适的退火温度。检测延伸时间是否充足。

(6) Mg²⁺浓度不合适

Mg²⁺浓度过低可影响PCR产量甚至使PCR扩增失败；Mg²⁺浓度过高会降低PCR的特异性，应适当调整Mg²⁺浓度。

Q2：空白对照出现扩增产物。

A2：(1) 引物设计不合理

扩增序列与非目的扩增序列有同源性，PCR也可以扩增出非靶序列的序列。

(2) 若扩增产物条带大小与目的条带一致，说明有污染