TruePrep Flexible DNA Library Prep Kit for Illumina
转座酶法建库；全基因组测序；宏基因组测序
· 建库耗时短：快速的建库流程，仅需1.3 h；
· 广泛的兼容性：兼容投入量100 pg - 500 ng；兼容不同物种基因组；
· 下机数据质量优：下机数据覆盖度高、均一性好；
1. 宽广的起始投入量兼容性（100 pg - 500 ng）
以不同投入量的基因组DNA为模板，参照各公司建库流程进行文库构建，使用Qubit检测文库浓度。结果显示：相比同类产品，Vazyme #TD504文库产量更高，且平均文库大小与同类产品一致。
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图1. TD504与其他公司同类型产品文库产量与平均文库大小对比 |
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2. 物种兼容性
以不同物种基因组DNA为模板进行文库构建，参照各公司建库流程进行文库构建，使用Qubit检测文库浓度。结果显示：针对不同物种Vazyme #TD504均能实现高效建库，相比同类产品，文库产量更高。
图2. 不同投入量下平均文库大小
3. 优异的测序数据质量
以不同物种基因组 DNA 为模板，分别使用 Vazyme #TD504 和其他公司同类产品进行建库，文库质控合格后，使用 HiSeq X-TEN/Novaseq 6000 进行 PE150 测序。测序结果显示，以不同物种为模板， Vazyme #TD504 相比同类产品，测序数据质量优、均一性好。
图3. 不同物种下机数据质量
均一性:
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TD504（50 ng 拟南芥gDNA）  |
I*（50 ng拟南芥gDNA） 
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图4. 拟南芥下机数据均一性 |
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4. 高效的微生物检出率：
建立一个微生物检出模型：1 ng 293 细胞 gDNA 中分别加入 10 pg(1/100)、1 pg(1/1000)、100 fg(1/10000)的E.coli gDNA和λDNA，下机数据截取相同数据量后，与其他公司同类产品进行比较，Vazyme #TD504在三组模型中的Mapped reads数均高于其他公司同类产品。在E.coli gDNA和λDNA只占1/10000时，Vazyme #TD504仍有较高的Mapped reads数。
图5. 不同微生物模型Mapped reads
BOX 1，TNB 2~8℃保存，其余组分室温保存，根据不同目的地调整运输方式。
BOX 2，-30 ~ -15℃保存，≤ 0℃运输。
1． 使用该试剂盒是否需要对DNA进行精确定量？
不需要。TruePrep Flexible DNA Library Prep Kit for Illumina将转座酶偶联到磁珠上，从而显著提升了DNA模板投入量的兼容性，可以将100 pg - 500 ng DNA模板制备成Illumina高通量测序平台专用的测序文库。
2． 是否适用于PCR产物建库？
可以，但应保证其长度>100 bp。因转座酶无法作用于DNA末端，所以PCR产物末端50 bp测序覆盖度会有所降低，推荐在制备PCR产物时将待测区域两端各延长50 - 100 bp。
3． 组分TNB能否冻存？
不能。强烈建议将TNB置于2 ~ 8℃保存。
4． 使用TWB漂洗磁珠时，能否始终保持在磁力架上不进行重悬？
不推荐。不重悬漂洗可能会导致最终的文库产量比预期低。
5． 扩增后的PCR产物带有磁珠，能否使用转移的上清进行纯化或分选？
可以。该操作对文库产量及峰型无显著影响。
6． TruePrep系列能提供多少index组合？
最多提供384种index组合。其中TruePrep Index Kit V2 for Illumina(Vazyme #TD202)包含8种N5XX和12种N7XX，可提供96种index组合；TruePrep Index Kit V3 for Illumina(Vazyme #TD203)包含16种N6XX以及24种N8XX，可提供384种index组合。
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