BioSmart Double-Block Taq Antibody
双位点封闭、高特异性的Taq DNA Polymerase抗体
适用于各种基于Taq DNA Polymerase的热启动PCR、qPCR反应。
BioSmart Double-Block Taq Antibody是一款对Taq DNA Polymerase进行双位点封闭的单克隆抗体组合试剂。PCR体系在配制或升温过程中,Taq DNA Polymerase封闭效率(热启动)不佳会导致酶活泄露。聚合活性泄露易导致引物二聚体的形成和非特异扩增,5'→3'核酸外切酶活性泄露易导致部分探针或引物被切割,均影响试剂性能。基于以上问题,经过BioSmart平台分别定向筛选与Taq DNA Polymerase聚合和外切结构域具有高亲和力的单克隆抗体。使用本产品封闭Taq DNA Polymerase,能够显著提升扩增特异性,复孔重复性,以及低模板检出稳定性。
双位点封闭
封闭率高
特异性好
1)更高的封闭率
将引物和单链模板,分别与未封闭、单位点封闭以及双位点封闭抗体封闭的Taq酶混合,55℃实时监测SYBR的荧光值(图1),以此反应Taq酶聚合活性的封闭情况。将引物、探针分别与未封闭、单位点封闭以及双位点封闭抗体封闭的Taq酶混合,55℃实时监测探针被切割后的荧光信号值(图2),以此反应抗体5' - 3'外切酶活性的封闭情况。结果显示,双位点封闭抗体P141能够很好的封闭Taq酶的聚合活性以及5' - 3'外切酶活性。
图1. 不同抗体封闭Taq酶后,检测SYBR荧光值变化
图2. 不同抗体封闭Taq酶后,检测被切割的探针荧光值变化
2)更高的特异性
选择低模板检出不佳的2个体系,使用P141及竞品Taq酶抗体进行Taq酶封闭,分别使用封闭后的Taq酶及裸Taq进行扩增。结果显示,P141封闭后的Taq酶,扩增平台值更优,说明P141能够更好的对Taq酶的活性进行封闭,可以有效的提高体系的特异性(图3)。
图3. qPCR检测不同抗体封闭后的Taq酶扩增情况
3)酶活可快速释放
分别用P141、竞品抗体封闭Taq酶、裸Taq酶,在95℃下热激30 s,检测酶活。结果显示95℃热激 30 s后,P141封闭后的Taq酶可释放95%以上的酶活,与同类产品Supplier A、B相当。
表1. 不同抗体封闭Taq酶,热激后酶活的释放情况
-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。
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