Taq Pro Multiplex DNA Polymerase (High specificity)
特异性高的多重热启动Taq DNA聚合酶
· 均一性:反应体系中所有的引物都能得到高效延伸;对不同类型的引物和模板扩增效率一致
· 特异性:有效减少由引物错配引起的非特异性扩增
· 产量高:在各种体系中,扩增产物产量高
· 兼容性:兼容不同GC含量(25%-75%)的扩增片段及兼容不同Tm值的引物
本产品是针对于多重PCR精心研发的、经抗体法修饰的新一代热启动DNA聚合酶,扩增特异性得到显著提升。搭配精心优化的缓冲体系可兼容宽泛的产物GC含量、引物Tm值,同时亦可兼容全血、血卡等直扩,无需额外优化,即可在60℃通用退火温度下完成大多数多重PCR检测。
1. 扩增效率高
使用Vazyme#PM202以人基因组为模板扩增一系列目的片段,从70 bp-2790 bp,目的片段不断增加,利用琼脂糖凝胶电泳分离产物。 所有预期的片段都在凝胶中清晰可见, Vazyme#PM202可以在同一反应中成功扩增多达 25个目的片段。70/97/112/128/167/178/212/239/243/267/288/306/350/383/419/531/635/710/843/916/1048/1296/1598/2140/2790bp。Maker:5000 bp DNA Ladder (Vazyme#MD102)。
2. 优异的特异性
高度优化的反应体系使得Vazyme#PM202在扩增特异性以及GC兼容性方面都有优异的表现。在高GC体系(目的片段GC含量从60%-76%)中,同时测试不同品牌多重PCR扩增试剂的扩增性能。结果表明Vazyme#PM202在目的片段产量、条带均一性及特异性上均显著优于其他品牌试剂(红色框内为目的片段)。
3. 高度耐杂能力
在反应体系中投入不同类型的杂质,测试不同品牌多重PCR试剂的耐受性能,结果表明Vazyme#PM201/PM202可以耐受更高的杂质投入量并保持正常扩增,与其他品牌试剂相比具有明显的耐杂优势!
土壤浸出液
猪肺泡浸出液
组 分 |
PM202-01 (200 rxns/25 μl/rxn) |
PM202-02 (1,000 rxns/25 μl/rxn) |
2 × Multiplex Buffer (High specificity) |
2 × 1,250 μl |
12.50 ml |
Multiplex DNA Polymerase (High specificity) (10 U/μl) |
200 μl |
1 ml |
-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输
Q1:扩增产物少或没有扩增
A1: ① 血液、血卡、拭子等直扩类实验时,确认PCR程序预变性条件为95℃/5 min,以充分释放模板。
② 使用高质量的引物。检查引物是否降解,确认引物终浓度为0.2 μM。
③ 增加PCR循环数。
④ 降低退火温度(间隔1 ~ 3℃),必要时进行退火温度梯度测试。确认退火时间为90 sec,必要时可延长退火时间至3 min。
⑤ 检查单对引物的扩增性能和特异性。
⑥ 使用高质量的模板。确认DNA模板纯度、浓度;增加模板使用量。
⑦ 产物过长,重新设计引物。
⑧ 延长循环内的延伸时间;延长彻底延伸时间。
⑨ 提高低产或缺失扩增子引物使用量。
Q2:存在非特异性扩增
A2: ① 减少循环数。
② 提高退火温度。
③ 减少引物使用量。
④ 重新设计引物。
⑤ 降低酶量。
Q3: 电泳时条带模糊
A3: ① 减少循环数(每次减少3个循环)。
② 减少起始模板量。
③ 延长彻底延伸步骤时间至15 - 30 min。 ④ 降低电泳电压,更换新的电泳缓冲液。
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