DNA Marker/Ladder
稳定、清晰、准确的DNA 分子量Marker
琼脂糖凝胶电泳；DNA分子量标准
· 稳定性好：室温可存放6 个月，所有条带清晰、致密
· 操作简便：即用型产品，跑胶时可直接取适量本产品进行电泳
DNA Marker/Ladder 由特定分子量的双链DNA 片段组成，已混有含蓝色染料的上样缓冲液，适用于琼脂糖凝胶电泳时作为DNA 分子量标准。DNA Marker/Ladder 中所有片段均由质粒经酶切、纯化后获得，电泳时Marker/Ladder 的条带更加清晰、致密；条带之间的质量比更准确、真实。DL2000 Plus DNA Marker 中的750 bp 片段、DL5000 DNA Marker 中的1,000 bp 片段、100 bp DNA Ladder 中的500 bp 片段以及1 kb DNA Ladder 中的5 kb 片段的DNA 浓度为100 ng/5 μl，显示亮带；其余所有条带的DNA 浓度为50 ng/5 μl。
-20℃保存；融化后于4℃保存，避免反复冻融。
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Q1：Marker跑胶拖带或跑不开
A1：（1）电压：按照推荐的电泳条件，1 × TAE缓冲液，0.8% - 2.0%琼脂糖凝胶，正负极之间电压4 - 10 V/cm(常规电泳仪建议180V电压)跑胶；
（2）染料类型：如果大分子染料建议使用泡染法或者预混法；
（3）琼脂糖凝胶：
①建议在溶胶时使琼脂糖颗粒全部溶解，若使用微波炉加热进行溶解，可以让液体沸腾2-3次；
②确保胶充分冷却凝结，30-60min为宜，如果不能及时使用，要放在TAB/TBE液体中保存；
（4）试剂保存条件：放在4度保存，避免反复冻融。
Q2：Marker的条带亮度问题
A2：（1）每条亮度都一样：若使用泡染法，可能是泡染的时间太长或太短，需要根据情况摸索调整时间；
（2）仅底部两条带亮：条带降解导致；
（3）亮度很弱：
①上样量小于5ul会导致条带很暗；
②制胶时琼脂糖颗粒未完全溶解或者凝固后不均匀。
Q3：Marker条带缺失
A3：（1）条带重叠：延长跑胶时间，适当提高电压；
（2）小条带跑出胶或丢失：降低电压缩短跑胶时间。使用EB作为核酸染料时，由于EB与DNA的结合力较弱，且EB与DNA的电泳方向相反。电泳时间较长时，DNA条带跑到前面，EB就可能与DNA脱离，从而使条带变弱。因此电泳时将溴酚蓝跑到凝胶2/3处即可停止电泳；
（3）EB添加量低。
Q4：Marker条带模糊
A4：（1）Marker条带出现降解：请确保在使用过程中避免核酸酶污染；
（2）电泳缓冲液陈旧：电泳缓冲也多次使用后，离子浓度降低，ph值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果，建议经常更换电泳缓冲液；
（3）电泳条件不合适：电泳时电压应不超过20V/cm，温度应低于30℃。
Q5：Marker条带不规则，如哑铃型或波浪形
A5：（1）电泳缓冲液陈旧：老化的电泳缓冲液离子浓度降低，ph值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果，建议经常更换电泳缓冲液；
（2）电泳条件不合适：电泳时电压最高不应超过20V/cm，电压太高可能也会导致Marker条带出现不规则现象；
（3）凝胶质量差以及凝胶冷却时凝固不均匀。
Q6：Marker条带弯曲
A6：（1）电压过高或电压不稳；
（2）如果使用大分子染料，建议使用泡染法或者预混法；
（3）Marker加在胶两端的孔容易出现条带弯曲；
（4）更换新鲜的缓冲液。
（5）琼脂糖颗粒未完全溶解或凝胶时间过短，30-60min为宜。
Q7：能不能用作聚丙烯酰胺凝胶电泳Marker？
A7：不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。
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