EpiArt Ultrafast DNA Methylation Bisulfite Kit
10 min超快速甲基化转化 助力肿瘤早筛
DNA甲基化BS转化 肿瘤早筛 甲基化水平研究
DNA甲基化与基因表达和基因功能密切相关，在基因印迹、胚胎发育、染色体基因沉默和细胞周期调控等生理和病理过程中发挥着重要作用。EpiArt Ultrafast DNA Methylation Bisulfite Kit是甲基化转化试剂的全新升级版本，无需粉末配制，转化试剂全预混，转化时间仅需10 min，未甲基化的胞嘧啶转化效率≥99.5%。EpiArt Ultrafast DNA Methylation Bisulfite Kit DNA投入量范围为1 ng - 2 μg，转化后的产物适用于PCR扩增、qPCR检测、内切酶消化和NGS建库测序等下游应用。
转化速度快：转化时间缩短至10 min
转化效率高：未甲基化的胞嘧啶转化率≥99.5%
操作简便：转化试剂预混，无需溶解稀释
1. 高转化率
以293细胞 gDNA为模板，掺入1% Unmethylated Lambda DNA，起始投入量分别为1 ng、10 ng、50 ng、200 ng、1 μg和2 μg。不同起始投入量下Vazyme #EM112的转化率均高于Supplier A、Supplier B。
2. 高回收率
以293细胞 gDNA为模板，起始投入量分别为1 ng、10 ng、50 ng、200 ng、1 μg和2 μg。低起始投入量下Vazyme #EM112的转化产物进行qPCR检测，Ct值均低于Supplier A、Supplier B。高起始投入量下Vazyme #EM112的转化产物进行单链DNA定量，Vazyme #EM112回收率高于Supplier A、Supplier B。
3. 兼容不同样本类型
以人血gDNA、cfDNA为模板，掺入1% Unmethylated Lambda DNA，起始投入量分别为人血gDNA（1 ng、10 ng、50 ng、200 ng）、cfDNA（1 ng、10 ng）。不同样本类型测试中Vazyme #EM112的转化率均高于Supplier A、Supplier B。
4. 兼容高低GC物种
以拟南芥gDNA、嗜盐古菌gDNA为模板，掺入1% Unmethylated Lambda DNA，起始投入量分别为200 ng。不同样本类型测试中Vazyme #EM112的转化率均高于Supplier A、Supplier B。
BOX 1：15 ~ 25℃保存，室温运输。
BOX 2：2 ~ 8℃保存，冰袋运输。
Q1： DNA回收率低的原因有哪些？
A1：（1）起始的DNA质量较差
确保DNA的A260/280比率在1.7-1.9凝胶电泳的DNA条带清晰，无降解。
（2）E-Wash Buffer醇含量不足
请加入指定体积的无水乙醇，勿长时间开盖放置。
（3）E-DesulphonationBuffer有机溶剂含量不足
请勿长时间开盖放置。
（4）脱硫反应时间过长，超过20 min
严格控制脱硫反应步骤时间，最长不要超过20 min。
Q2：DNA转化率怎么测定？
A2：为了对实验的转化效率进行质量控制，建议将unmethylated lambda DNA作为阴性标准品，在亚硫酸氢盐转化前按照1%质量比掺入样品中，如样品在转化前需要进行打断，则需在打断前掺入阴性标准品，通过分析转化产物测序数据中lambda DNA中C转化为T的效率，来评估一次实验的转化率。
Q3：DNA转化率降低的原因有哪些？
A3：（1）CT Conversion Reagent失效
使用前请涡旋混匀，使用后需将管盖严格拧紧，并在其有效期内使用。
（2）反应温度或时间设置错误
请按照说明书正确设置反应温度与时间。
（3）Input DNA样本GC含量高或投入量不在最佳范围
可延长转化时间，将反应程序变更为95℃ 5 min，60℃ 5 min，95℃ 5 min，60℃ 5 min，20℃ hold （＜20 h）。
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