FastPure Viral DNA/RNA Mini Kit V2
11min 多样本病毒核酸“一盒端”
病毒DNA/RNA共提取;产物可用于逆转录;PCR;荧光定量PCR;二代测序以及Northern杂交
· 简单快速:常温操作11 min即可
· 试剂预混:无需额外准备醇类试剂
· 样本兼容性广:适用于全血、血清、血浆、拭子、口腔液、组织、粪便、精液、环境等多种样本
本试剂盒采用特异性吸附技术,利用独特的裂解、结合体系实现快速提取高纯度的病毒DNA/RNA,只需准备样本,无需准备乙醇、异丙醇等试剂、无需进行高温孵育。本试剂盒适用于全血、血清、血浆、拭子、口腔液、组织、粪便、精液、环境等多种样本。获得的核酸得率高,纯度高,可直接用于逆转录、PCR、荧光定量PCR、二代测序以及Northern杂交等下游相关实验。
1. 简单快速
Vazyme #RC313拿来即用,操作简便,常温操作11 min即可(图1)。
图1 核酸提取操作流程
2. 样本兼容性广
检测不同类型模拟样本中的非洲猪瘟病毒(ASFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪轮状病毒(PoRV)。参照Vazyme #RC313(V)和其他厂家同类产品(A、B、C、D、E、F、G、H、I)提取流程进行提取,使用qPCR对提取产物进行检测,平均Ct值越低,表明提取效率越高。结果表明,Vazyme #RC313对不同样本中DNA和RNA病毒的提取效率优于或持平于其他厂家同类产品,尤其在全血样本上提取效率有显著优势(图2)。
图2 提取产物qPCR定量结果
15 ~ 25℃保存
1. Proteinase K组分需要放在低温保存吗?
A:若想要长期存放,试剂盒打开后建议将Proteinase K放在-30 ~ -15℃保存,保质期两年。
2. 能兼容保存液吗?
A:可以兼容,测试过20种不同厂家灭活、非灭活类保存液,均可兼容。
3. 环境样本(纱布)怎么处理?
A:建议离心取上清。用纱布取样时,常常会带入大量的杂质,比如泥沙颗粒,会影响核酸与吸附柱结合,甚至堵塞吸附柱。
4. 组织匀浆样本可以不离心吗?
A:若组织块较小,且加入的PBS等液体的量较多,样本较稀,则可以不离心。
5. 精液样本需要离心取上清吗?
A:精液样本中含有大量蛋白质,RC313含有的Proteinase K组分,能够充分消化,加上裂解液较强的裂解能力,所以精液一般无需离心,若样本较为粘稠,为防止堵塞吸附柱,可使用PBS进行稀释。
6. 样本体积不足时,不使用PBS补足至300μl有影响吗?
A:1)建议补齐,保证核酸结合最适条件。
2)若样本充足,建议投入300μl。
7. 样本未恢复至室温,会有影响吗?
A:样本温度过低时,对于吸附柱与核酸的结合有一定影响。
8. 加入裂解液后可以56℃孵育对病毒进行灭活吗?
A:加入裂解液后不建议高温孵育,会对核酸造成损伤损害,提取效果会受到影响。若想要保证病毒完全灭活,可在样本前处理时进行热灭活。
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