FastPure Viral DNA/RNA Mini Kit Pro
12min 微量病毒核酸“轻松捕获”
病毒DNA/RNA共提取；产物可用于可直接用于逆转录；PCR；荧光定量PCR；二代测序；Northern杂交
· 提取效率高：轻松捕获微量核酸
· 快速提取：常温操作12 min即可
· 样本兼容性广：适用于全血、血清、血浆、拭子、组织、肺泡灌洗液、细胞培养上清液等多种样本
本试剂盒基于独特的裂解体系和硅胶膜的特异性吸附，无需高温孵育，即可快速高效纯化病毒DNA/RNA。本试剂盒样本兼容性广，适用于从全血、血清、血浆、拭子、组织、肺泡灌洗液、细胞培养上清液等多种样本；搭配Carrier RNA可显著提高微量核酸的回收率；且产物纯度高，可直接用于逆转录、PCR、荧光定量PCR、二代测序以及Northern杂交等下游相关实验。
1. 快速提取微量核酸
检测不同稀释梯度下胎牛血清模拟样本中的低浓度非洲猪瘟病毒（ASFV）和低浓度猪流行性腹泻病毒（PEDV）。参照Vazyme #RC323（V）和A厂家同类产品提取流程进行提取，使用qPCR对提取产物进行检测，平均Ct值越低、检出数量越多，表明提取效率越高。结果表明，Vazyme #RC323对低浓度病毒样本的提取效率优于A厂家同类产品（图1）。
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图1 低浓度样本提取产物qPCR结果
2. 样本兼容性广
检测胎牛血清、猪血、肺泡灌洗液、咽拭子、唾液和Hela细胞培养液等模拟样本中的伪狂犬病病毒（PRV）和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）。参照Vazyme #RC323（V）和A厂家同类产品提取流程进行提取，使用qPCR对提取产物进行检测，平均Ct值越低，表明提取效率越高。结果表明，Vazyme #RC323对不同样本中DNA和RNA病毒的提取效率基本优于A厂家同类产品（图2）。
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图2 不同类型样本提取产物qPCR结果
BOX 1：-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输
BOX 2：15 ~ 25℃保存。
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1. 能兼容保存液吗？
A：可以兼容，测试过20种不同厂家灭活、非灭活类保存液，均可兼容。
2. 组织匀浆样本可以不离心吗？
A：若组织块较小，且加入的PBS等液体的量较多，样本较稀，则可以不离心。
3. 精液样本需要离心取上清吗？
A：精液样本中含有大量蛋白质，RC323含有的Proteinase K组分，能够充分消化，加上裂解液较强的裂解能力，所以一般精液无需离心，若样本较为粘稠，为防止堵塞吸附柱，可使用PBS进行稀释。
4. 样本体积不足时，不使用PBS补足至300μl有影响吗？
A：1）建议补齐，保证核酸结合最适条件。
2）若样本充足，建议投入300μl。
5. 样本未恢复至室温，会有影响吗？
A：样本温度过低时，对于吸附柱与核酸的结合有一定影响。
6. Carrier RNA会影响下游检测吗？
A：Carrier RNA会存在提取产物里，下游做qPCR检测时，引物探针特异性结合在靶标核酸上，Carrier RNA不会影响检测结果。
7. 加入裂解液后可以56℃孵育对病毒进行灭活吗？
A：加入裂解液后不建议高温孵育，会对核酸造成损伤损害，提取效果会受到影响。若想要保证病毒完全灭活，可在样本前处理时进行热灭活。
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