SuperFemto ECL Chemiluminescence Kit
飞克级高灵敏度蛋白检测
Western Blot、EMSA等基于HRP标记的抗体或核酸探针的蛋白和核酸印迹检测。
· 高灵敏度：检测可低至飞克级
· 防过曝性能好
本试剂盒以化学发光方法检测蛋白质或核酸类生物大分子，可通过辣根过氧化物酶(HRP)实现目的蛋白或核酸的免疫印迹检测。本试剂盒包含增强型的鲁米诺底物和稳定的过氧化物体系，在灵敏度检测方面有显著提升，能检测低至飞克级的微量蛋白。印迹膜(如NC、PVDF)经过ECL工作液孵育后，可用X光胶片曝光，也可以直接进行CCD扫描拍照。
1. 高灵敏度
图1：纯化蛋白样本Western检测结果
飞克级检测，使用纯化蛋白进行检测，Vazyme的超敏型ECL化学发光试剂检测阈值可达32 fg
图2：不同ECL发光液293细胞蛋白样本Western检测结果
293细胞蛋白样本检测结果显示：Vazyme的超敏型ECL化学发光试剂灵敏度优于同类产品
不同ECL发光液在凝胶成像仪自动曝光条件下，Vazyme的超敏型ECL化学发光试剂成像时间短于同类产品
2. 防过曝性能好
图3：不同ECL发光液过度曝光结果显示
本实验设置了4个不同浓度梯度的蛋白质，Vazyme的超敏型ECL化学发光试剂的过度曝光时间晚于同类产品，且同类产品过度曝光程度更高
2 ~ 8℃避光保存
1. 膜上没有信号的原因有哪些？
（1）没有Marker或条带很弱，建议更换转膜液、排查正负电极或者转膜顺序是否正确；
（2）Marker正常：
①样本中无目的蛋白，建议换不同类型样本；
②蛋白被降解或本身丰度低，建议加入蛋白酶抑制剂或增加蛋白上样量；
③抗体不能识别目的蛋白或稀释比例过高，需确定该抗体是否适用于Western blot或提高抗体使用比例
2. 条带过曝或过粗怎么办？
（1）降低蛋白上样量或抗体使用浓度；
（2）减少ECL发光液用量或曝光时间。
3. 显色背景过深
（1）封闭不充分，建议延长封闭时间或新配制封闭液；
（2）一抗浓度过高，可提高一抗稀释比例；
（3）洗膜不彻底，建议延长洗膜时间或增加去垢剂强度；
（4）抗体与封闭剂出现交叉反应，检测一抗、二抗与封闭剂是否有交叉反应。
4. 荧光淬灭
（1）缓冲液出现杂质或污染，建议更换新的洗膜液；
（2）显影的膜变干燥，建议缩短操作时间或使用X光胶片。
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