SuperPico ECL Chemiluminescence Kit
低pg至高μg，日常蛋白稳定狙击
免疫印迹检测
- 高灵敏度：可检测低皮克级的蛋白
- 防过曝性好：高微克级蛋白过曝时间为15 min
- 荧光持续时间长：可曝光显影的时间达6 h
SuperPico ECL Chemiluminescence Kit包含增强型的鲁米诺底物和稳定的过氧化物体系，可通过辣根过氧化物酶(HRP)实现目的蛋白或核酸的免疫印迹检测。本试剂盒可检测低pg级的微量蛋白且荧光持续时间长。印迹膜(如NC、PVDF)经过ECL工作液孵育后，可用X光胶片曝光，也可以直接进行CCD扫描拍照。
1.灵敏度高
低皮克级检测，使用细胞总蛋白进行检测，Vazyme的高敏型ECL化学发光试剂检测阈值可达0.16 μg。
图1. 293细胞样本梯度上样的Western检测结果
2. 防过曝性能好
通过设置4个不同浓度梯度的蛋白质，Vazyme升级高敏型ECL化学发光试剂的过度曝光时间迟于同类产品，且同类产品过度曝光程度更高。
图2. 293细胞样本不同ECL发光液的Western检测结果
3. 荧光持续时间长
使用293细胞裂解液进行测试，蛋白上样量为：0.32 μg-10 μg，进行Western blot实验，进行自动曝光显影，每隔数小时直至6 h进行显影拍照。6 h后条带仍然能保持完整性。
图3. 不同含量的蛋白梯度时间的Western检测结果
2 ~ 8℃避光保存
Q1：膜上没有信号？
A1: (1) 没有Marker或条带很弱，建议更换转膜液、排查正负电极或者转膜顺序是否正确；
(2)Marker正常：
a.样本中无目的蛋白，建议换不同类型样本；
b.蛋白被降解或本身丰度低，建议加入蛋白酶抑制剂或增加蛋白上样量；
c.抗体不能识别目的蛋白或稀释比例过高，需确定该抗体是否适用于Western blot或提高抗体使用比例。
Q2：条带过曝或过粗？
A2: (1) 降低蛋白上样量或抗体使用浓度；
(2) 减少ECL发光液用量或曝光时间。
Q3：显色背景过深？
A3: (1) 封闭不充分，建议延长封闭时间或新配制封闭液；
(2) 一抗浓度过高，可提高一抗稀释比例；
(3) 洗膜不完全，建议延长洗膜时间或增加去垢剂强度；
(4) 抗体与封闭剂出现交叉反应，检测一抗、二抗与封闭剂是否有交叉反应。
Q4：荧光淬灭？
A4: (1) 缓冲液出现杂质或污染，建议更换新的洗膜液；
(2) 显影的膜变干燥，建议缩短操作时间或使用X光胶片。
Q5：试剂保存条件与保存时间？
A5:于4℃长期保存，室温可以保存1个月，工作液37℃可以保存一天。
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