HisyGo RT Red SuperMix for qPCR (+gDNA Wiper）
红色示踪型qPCR专用逆转录预混液（去基因组）
移液可视，高效逆转
第一链cDNA合成；逆转录；基因表达分析；两步法qRT-PCR检测
HisyGo RT Red SuperMix for qPCR (+gDNA Wiper)为全新一代可示踪qPCR专用逆转录试剂，在高效合成cDNA的同时，实现移液可视化。试剂盒中的5×gDNA Wiper Mix可去除RNA模板中残留的基因组DNA，因此无需跨内含子设计qPCR引物。4×HisyGo qRT Red SuperMix中含有逆转录反应所需的所有组分，加入模板RNA和RNase-free ddH2O即可迅速进行反应，同时具有终止gDNA Wiper的作用。本试剂中包含的红色示踪染料经过精心优化，不会对下游染料法或探针法qPCR的荧光信号采集产生干扰，保证扩增灵敏度和平台不受影响。
移液可视化：红色示踪染料能起到移液可视化的作用，可以降低在逆转录过程中出现错加漏加的概率；
高逆转效率：与其他反转录试剂相比 RT101 可得到更小的 CT 值；
高基因组清除效率：可有效清除高达500 ng基因组DNA，使获得的数据更加真实可靠。
1.移液可视化
HisyGo RT Red SuperMix for qPCR (+gDNA Wiper) 中包含的红色示踪染料能起到移液可视化的作用，可以降低在逆转录过程中出现错加漏加的概率，其染料经过精心优化，不会对下游染料法或探针法qPCR的荧光信号采集产生干扰，以保证扩增灵敏度和平台不受影响。
2.高逆转录效率
以1 μg 293细胞 RNA 为模板，使用 Vazyme #RT101以及市售其他逆转录产品，按照各自说明书推荐程序进行逆转录反应，将产物cDNA进行多个基因的qPCR 定量分析。结果显示，Vazyme #RT101优于Supplier A、B、C的相关逆转录产品。
3.高基因组清除效率
以 500ng的293细胞 gDNA为模板，使用 Vazyme #RT101以及市售其他逆转录产品，按照各自说明书推荐程序进行基因组清除与逆转录反应，另设置不进行基因组清除的gDNA组，将得到的逆转录产物与gDNA组进行qPCR 定量分析。结果显示，Vazyme #RT101、Supplier A、C、D、F基因组清除效率优于Supplier B、E，可清除500ng基因组。
-30 ~ -15℃避光保存，≤ 0℃运输。
Q1：基因组清除不干净怎么解决？
A：若 No RT control指示基因组未清除完全，建议通过NTC实验排查是否存在气溶胶污染。若排除气溶胶污染后仍存在清除不完全的情况，可将去基因组反应时间延长至15 min。
Q2：RT101 兼容的RNA投入量范围？
A：RT101可兼容 5 ug 的RNA投入量，但过高的RNA产生的过多cDNA可能超出qPCR的定量范围，此时需要正确稀释cDNA以达到下游qPCR试剂的兼容范围。一般来说，RNA投入量为1~5μg 时，可将cDNA稀释10倍使用。
Q3：RT101 后续能接PCR扩增吗？
A：RT101是qPCR专用预混液，不推荐使用RT101的cDNA产物作为长片段扩增模板，一般来说，RT101逆转录产物不超过550 bp。若客户想进行PCR扩增，建议使用通用型试剂RT101。
Q4：RT101 是否需要混匀操作？
A：RT101 里面含有甘油成分，需要对逆转录试剂进行混匀操作。
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