HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR
15 min一步搞定基因组清除与反转录
一步进行gDNA去除和第一链cDNA合成；qPCR
· 简便快捷的操作：基因组清除与逆转录一步完成
· 较高的cDNA 稳定性：热敏型DNase，失活更彻底，cDNA长久保存更稳定
简便快捷的操作
基因组清除与逆转录一步完成，只需加入RNA 模板，15min 即可完成反应。
优异的逆转录效率
分别以Hela 细胞、小鼠肝脏、拟南芥叶片10 ng / 1 μg RNA 为模板，使用HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR (Vazyme # R333) 与市面常见All-in-one 产品（Supplier TG-H、TG-E、TI）、非All-in-one 产品（Supplier Vazyme #R323、TA）同时进行逆转录。将得到的 cDNA 进行qPCR定量分析。
从图中可以看出，在不同模板上，Vazyme #R333 的扩增CT 值较小，说明Vazyme #R333 的逆转录效率更优异。
较高的cDNA稳定性
使用HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR (Vazyme #R333) 逆转100 ng HeLa 细胞RNA，将得到的cDNA 于37℃放置7 天、4℃放置4 周、冻融30 次进行测试，同时以-20℃存放cDNA 作为对照。将不同处理后的 cDNA 进行qPCR 定量分析。
从图中可以看出， cDNA 在各种条件下定量得到的△ CT 均在0.5 范围内（△CT 于±0.5 以内，认为两者差异可忽略不计），说明Vazyme #R333 逆转得到的cDNA 可于37℃存放7 天、4℃存放4 周、反复冻融30 次，cDNA 依然具有良好的稳定性。
本产品只需一步操作即可同时完成基因组清除与逆转录反应，操作简便、快捷，有效降低了加样过程造成的样品污染与RNA降解的风险。本产品包含HiScript® III Reverse Transcriptase、热敏型DNase以及针对基因组清除与逆转录一步反应优化的Buffer，延续了第三代逆转录产品高效率的特点；热敏型DNase生效快、效率高、易失活，cDNA可长久稳定保存。逆转录产物兼容染料法和探针法qPCR，可进行高性能的基因表达分析。
储存温度：-30 ~ -15℃，≤0℃运输。
Q1：R333后续可以做PCR吗？
A1：若扩增的目的片段在4.5kb以内，可以使用R333进行逆转录，由于R333中添加了一定比例的随机引物，会产生更多的cDNA短片段，所以部分体系可能会出现非特异性扩增；若对特异性要求较高，推荐使用R312进行逆转录。
Q2：tsRNA如何进行逆转录反应？
A2：tsRNA是一类由tRNA衍生的非编码小RNA，通常长度为18 ~ 40 nt，在维持mRNA稳定性、调节翻译等过程中发挥重要作用。由于tsRNA长度过短，对其进行qPCR定量时，无法直接对tsRNA进行正、反向引物的设计（通常正向引物就足以覆盖tsRNA全长），因此可以使用增加逆转录产物长度的miRNA逆转录试剂盒来解决这一问题，miRNA的逆转录方法有两种，分别是茎环法和加尾法。Vazyme为您提供高特异性的茎环法逆转录产品MR101，及高通量的加尾法逆转录产品MR201均可对tsRNA进行逆转。
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