BioSmart U+ Melt Pro Multiplex DNA Polymerase
超多重探针法熔解曲线专用的高成功率热启动单酶
多重病原检测；生殖遗传检测；用药指导；食品检测等
BioSmart U+ Melt Pro Multiplex DNA Polymerase是一款基于Taqman探针非对称PCR扩增技术定向开发的探针法熔解曲线专用试剂。本产品通过BioSmart平台定向筛选出切割活性和聚合活性适配、3'端错配识别能力强、杂质耐受性强的酶，搭配高封闭率双物种抗体（结合不同抗原表位）以及优化的缓冲体系，显著提升了该产品超多重扩增后的熔曲峰值、均一性、特异性、GC含量兼容性和杂质耐受性(血液、胍盐等)。同时，试剂中引入了dUTP/UDG防污染系统，用于控制扩增产物残留污染，保证结果的准确性，是一款适用于超多重探针法熔解曲线平台的qPCR试剂。
1.优越的扩增均一性
Vazyme #PM301与同类产品Supplier A 在非对称PCR多重体系（8重）下进行检测，结果显示：PM301在各个通道的熔解峰值更高、均一性较对照试剂表现更优。
图1. PM301与Supplier A在熔曲体系下的扩增结果
2.良好的特异性
在超多重体系下，引物、探针之间的非特异性结合概率增加，经BioSmart平台定向筛选出具有高封闭率、高特异性的热启动酶，同时搭配优化的缓冲体系，在超多重引物探针存在的情况下，仍能扩增特异性靶标。使用Vazyme #PM301与Supplier A同时扩增检测靶标和NTC，结果表明Vazyme #PM301能够有效降低非特异杂峰出现的概率，表现出更优的特异性。
图2. PM301与Supplier A特异性比对结果
-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输
Q1：熔曲峰值过低
A1：(1) 扩增曲线灵敏度差、平台值低：产量低导致峰值低，可适当增加MgCl2或酶的用量。
(2) 扩增曲线正常：探针消耗过大导致熔曲峰值低，可适当降低MgCl2或酶的用量，也可适当增加探针用量。
Q2：阴性对照出现明显扩增或熔曲峰
A2：(1) 反应体系污染：更换新的Mix、ddH2O、引物、探针重复实验。
Q3：实验重复性差
A3：(1) 加样体积失准：使用性能较好的移液枪；提高模板稀释倍数，提高加样体积。
(2) 定量PCR仪温度控制孔间差异大：定期校准仪器。
(3) 模板浓度太低：模板浓度越低，重复性越差，减少模板稀释度或提高加样体积。
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