VEX Exosome Isolation Reagent (from plasma)
从血浆中轻松get外泌体
血浆外泌体提取;产物可用于蛋白研究;RNA分析;高通量测序
· 操作简单快捷:无需超高速离心机,一步沉淀
· 兼容低量样本:起始样本血浆量可低至500 μl
· 产量稳定可靠:较低的离心力沉淀,获得的外泌体结构更完整,较传统提取方法具有更高产量
分别使用R公司、L公司、S公司以及Vazyme公司血浆外泌体提取试剂VEX Exosome Isolation Reagent (from plasma) (Vazyme #R603) 进行血浆中外泌体的提取,后进行NTA分析和Western Blot分析,并用所得外泌体进行RNA提取及miRNA-qPCR检测。
结果可见:VEX Exosome Isolation Reagent (from plasma) (Vazyme #R603) 提取得到的颗粒直径峰,其主峰落在30-150 nm之间,峰形更窄(图A)。并且在获得的数量和纯度上较其它试剂更好(图B)。同类产品L的CT值比较接近,且有一组Vazyme比L小0.8(图C)。Western Blot 显示均能检测到外泌体标志性蛋白CD63(图D)。
本产品是专门用于分离血浆样本中外泌体的试剂,只需通过简单的较低速度离心即可从样本中分离出大量外泌体。与传统的超高速离心相比,样本中的外泌体所受到压力较小,可以保持较完整的形态;同时提取过程所需的时间更短、所需样本起始量更低、提取效率更高。使用本产品获得的外泌体可应用于RNA分析、高通量测序、细胞共培养等多种下游应用。
组分 |
R603 |
VEX Exosome Isolation Reagent (from plasma) |
10 ml |
Proteinase K (20 mg/ml ) |
2 × 900 μl |
VEX Exosome Isolation Reagent (from plasma) 保存于2-8℃。
Proteinase K保存于﹣15—﹣30℃。
Q1:提取的外泌体如何应用于下游实验
A1:可直接使用下一步实验的试剂处理离心后的沉淀。例如,可直接加入合适裂解液后,用移液器吹打或使用匀浆器重悬沉淀后进入RNA 和蛋白提取流程。如需重悬,可用适量1 × PBS 重悬离心后的沉淀。
Q2:血浆外泌体提取为什么需要添加Proteinase K
A2:血浆中含有大量蛋白,如纤维蛋白原等凝血因子,会对后续外泌体研究的一些实验造成不必要的影响。因此如果血浆提取的外泌体不进行蛋白研究,可预先使用Proteinase K 进行消化;需注意Proteinase K 可能会消化外泌体表面蛋白。
Q3:一次实验需要多少体积血浆
A3:至少添加0.5 ml 血清样本。更少的血清体提取产量可能较低,不能满足后续实验需求。
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