Coomassie Blue Fast Staining Solution (No-decolorization)
考马斯亮蓝快速染液(免脱色)
一染即蓝,灵敏安全
蛋白定量、SDS-PAGE染色
1. 15 min快速染色,无需脱色
2. ng级染色灵敏度,条带清晰
3. 稳定性好无沉淀,染色均一
1. 15 min快速染色,无需脱色
从左至右,依次使用 Hela 细胞裂解液( 上样量为: 20 μg、10 μg )和BSA纯化蛋白( 上样量为: 500 ng、100 ng、50 ng、10 ng )进行电泳,电泳后,使用E901与其他品牌产品染色15 min后,E901肉眼可观察10 ng条带,拍照可观察50 ng条带,且背景更干净。
2. ng级染色灵敏度,条带清晰
从左至右,依次使用 Hela 细胞裂解液( 上样量为: 20 μg、10 μg )和 BSA 纯化蛋白( 上样量为: 500 ng、100 ng、50 ng、10 ng )进行电泳,电泳后,使用 Vazyme E901 与其他品牌产品均染色 1 h,相较于其他品牌,染色灵敏度一致,E901背景更干净,条带更清晰。
3.稳定性好无沉淀,染色均一
室温过夜染色后,E901染液的染料分布均匀,无杂质出现,其他品牌产品有白色或者黑色颗粒出现,表明E901染液稳定性更好,染色均一性更佳,实验数据清晰可见。
15 ~ 25℃保存,室温运输。
Q1:相较于传统染液对比,E901的优势是什么?
A1:(1)操作更便捷:传统PAGE胶染色用的是考马斯亮蓝G-250或R250,染液需要A液和B液混合使用,染色慢且需要较长时间脱色,步骤较繁琐;E901的蛋白快速染液无需脱色,染色时间短。
(2)灵敏度更高:传统染色液灵敏度范围在30-50 ng左右;E901可在15 min内检测到ng级别条带,过夜可以检测到5 ng条带。
(3)安全性更高:传统染液味道大,含有毒、有刺激成分的甲醇和醋酸等;E901用无毒的乙醇代替甲醇,在使用过程中,无需特殊设备也无需煮沸加热等脱色步骤,更安全高效。
Q2: E901产品为什么不需要脱色?
A2:传统考马斯亮蓝染液在染蛋白凝胶的时候,染料结合蛋白的同时也会非特异性结合凝胶,凝胶背景着色深,需用脱色液或清水煮沸脱色后才能对目的条带进行观察;E901染色特异性更好,对凝胶非特异性染色弱,即使过夜染色也不会使凝胶着色,因此无需进行脱色。
Q3:E901产品灵敏度多高?
A3:实验测试数据表明,该款染液在2 min内就能使胶上蛋白(500 ng)显色,染色15 min即可观察到ng级别的蛋白条带,随着染色时间延长,条带更加清晰,背景不随之加深,过夜染色后可以观察到5 ng条带。但不同蛋白种类,其等电点和蛋白丰度有所不同,对应染色时间可能有所差异。
Q4:蛋白含量低,染色较浅怎么办?
A4:E901染液在2 min内即可使蛋白(500 ng)显色,若蛋白含量低,颜色较淡,可适当延长染色时间。此外,染色时间与凝胶的厚度也有关系,若凝胶较厚,建议适当延长染色时间。
Q5:染色结束后,凝胶如何保存?
A5:染色结束后,如果观察条带已经符合预期,观察结束后,可将凝胶保存在清水中,清水具有净化背景的作用,使得背景更加透明,条带对比度更高。
Q6:E901是否可以回收使用?
A6:经测试E901可以重复利用3次,随使用次数的增加,染色速度会略微下降,可以延长染色时间,染液灵敏度不受影响。
Q7:回收利用的染液出现沉淀或絮状物,是否能够继续使用?
A7:E901通过吸附去垢剂来提升染色效率,随着使用次数增加,残留在染液中的SDS会增多,可能会产生银色絮状或微量沉淀,属于正常现象。可以摇晃混匀或在37℃水浴中溶解,回收利用的染液建议单独存放。
Q8:E901的保存条件:
A8:E901稳定性良好,保存温度为15 ~30 ℃,室温染色可以获得更好的染色效果;由于回收后的染液会吸附电泳液和凝胶中的SDS,低温会使得SDS沉淀,因此,回收的染液建议室温保存。
Q9:E901染色感觉没有传统染色对比度高?
A9:传统染色灵敏度在30-50 ng左右,E901染液灵敏度可检测到5 ng条带,E901背景干净呈现透明状,条带对比度看起来没有传统染色液明显,但不影响实验结果。
Q10:考染可以用于哪些类型的凝胶?
A10:经测试,E901适用于SDS-PAGE及Native-PAGE凝胶染色,兼容自制胶、预混液(E301-E305)和预制胶等多种类型的凝胶,不同类型凝胶由于组分不同,染色速度可能有所差异。
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