One-Step PAGE Gel Fast Preparation Kit (12%)
一步制胶,快到飞起
聚丙烯酰胺凝胶的制备;凝胶可用于PAGE凝胶电泳
·制胶速度快:只需将(AB液)溶液两两混合,加入促凝剂即可凝胶,制胶仅需15 min。
·操作简便:彩色上层胶,拥有三种颜色方便上样和浓度识别。
·电泳后条带清晰:不同浓度的蛋白胶预混液制胶后,加蛋白Marker电泳,每个浓度下条带均清晰可见。
·无需添加TEMED:无需添加有微腥臭味的TEMED,体验感佳。
One-Step PAGE Gel Fast Preparation Kit适用于聚丙烯酰胺凝胶的快速制备。本产品采用上层胶和下层胶的预混配方,只需将试剂两两混合,加入促凝剂即可凝胶。灌入下层胶后,无需液封,可直接灌入上层胶,简便快捷。所配的上层胶带有颜色,方便点样和区分不同凝胶。 配套提供的改良型促凝剂APS,具有良好的稳定性和促凝效果,配胶过程中无需添加TEMED。本试剂盒可配制125块mini PAGE胶(以 0.75 mm厚度胶计算),灌制的凝胶可用于变性或非变性PAGE凝胶电泳。
不同浓度的蛋白胶预混液制胶后,加 5 μl 180 kDa 蛋白 Marker (Vazyme #MP102)电泳;结果显示,在每个浓度下条带均清晰可见。
APS,-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输,可在2 ~ 8℃保存至少3个月;
其他组分,2 ~ 8℃保存
常见问题与解决方案
Q1:说明书上的凝胶时间为15 mins,为何我的凝胶时间超过了15 mins?
A1:凝胶时间跟温度相关性很大,温度较低凝胶时间会缓慢;建议A与B成分混合后,在加APS之前,可以在室温放置5分钟左右平衡一下温度;也可适当提高促凝剂APS的用量(在说明书用量的基础上增加5%-10%)以加快凝胶速度。
Q2:可以用蛋白胶预混液进行非变性蛋白电泳吗?
A2:可以的,需要注意的是进行非变性电泳时电泳缓冲液用Tris和甘氨酸配制即可,不加SDS。
Q3:在灌注上层胶的时候,把下层胶冲散了,怎么可以避免这种情况发生?
A3:灌注上层胶的时候,建议沿着长玻璃板缓慢注入。
Q4:APS放-20℃,融化需要一段时间,可以放4℃吗?
A4:APS可分装,在4℃可至少存放3个月,性能稳定。
Q5:制胶后可在4℃存放多久?
A5:可在4℃保存1-2周,为保持较好的电泳效果,请尽量现配现用。
保存方法:制胶后,连同梳齿置于自封袋中,并加少量电泳缓冲液保持胶板湿润,置于4℃保存。
Q6:上层胶和下层胶界面不平齐?
A6:需要在下层胶凝固前灌入上层胶,灌注上层胶要避免将下层胶冲散,可沿着长玻璃板轻缓注入;如想获得更平齐界面,也可采用两步法制胶,在灌注下层胶后先用ddH2O或醇液封,待下层胶凝固后再灌注上层胶。
Q7:插梳齿时梳齿下方有气泡?
A7:倾斜插入梳齿可有效避免气泡产生。
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