VAHTS Universal DNA Library Prep Kit for MGI
全基因组测序；扩增子测序；免疫共沉淀测序；宏基因组测序；甲基化测序；16srDNA测序；靶向测序
· 更短的建库耗时：单个文库构建仅需75 min
· 更高的接头连接效率：更高文库转化率
· 更简便快捷的操作：预混Mix减少操作误差
· 更宽的模板兼容范围：起始Input DNA可兼容100 pg-4 μg
· 更广泛的样本兼容性：适用于片段化DNA、cfDNA、FFPE DNA、ChIP DNA等
VAHTS Universal DNA Library Prep Kit for MGI是针对MGI高通量测序平台定向优化而成的文库构建试剂盒。本试剂盒可以将100 pg - 4 μg Input DNA转换成MGI高通量测序平台专用文库。作为全新的升级版本，VAHTS Universal DNA Library Prep Kit for MGI通过对末端修复模块、连接模块和文库扩增模块的整体改进，使文库转化率和扩增文库产出大幅提升，广泛适用于多种样本的PCR文库构建。试剂盒中提供的所有试剂都经过了严格的质量控制和功能验证，较大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。
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组分 |
NDM607-01 |
NDM607-02 |
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End Prep Mix 4 |
360 μl |
4 × 360 μl |
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Rapid Ligation Buffer 2 |
600 μl |
4 × 600 μl |
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Rapid DNA Ligase |
120 μl |
480 μl |
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VAHTS HiFi Amplification Mix |
600 μl |
4 × 600 μl |
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PCR Primer Mix for MGI |
120 μl |
480 μl |
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Control DNA (264 bp，50 ng/μl) |
10 μl |
10 μl |
-30 ~ -15℃保存。
Q1:文库产量偏低
A1: （1）重新定量投入模板量，确认模板起始量是否正确。若低于下限（100 pg），需提高投入模板量；
（2）若模板质量较差，可依据说明书适当提高循环数或使用高质量模板；
（3）请确认每一步体系以及程序是否按照说明书进行，并注意每一步骤中各项操作细节；
（4）文库纯化磁珠干燥环节，不能时间过长导致磁珠过于干燥。过于干燥也会降低产量；
（5）进行文库扩增时，需确保无磁珠残留，否则可能抑制扩增反应；
（6）qPCR文库定量时，请确保循环时间以及循环数正确。
Q2: 建库后，嵌合体占比较高。
A2: 这种情况是出现过度扩增。过度扩增的文库是在引物已经耗尽的情况下，文库跟文库直接乱搭造成的非特异性扩增，而引入人为造成的嵌合体。
Q3:不同的样品之间加了一样的index，怎么解决？
A3: 将同样index的样品分开不同的lane上机。
Q4:2100检测有明显的接头二聚体特征峰
A4:（1）可适当降低磁珠纯化的乘数；
（2）适当降低接头浓度。
Q5. 其他注意事项
A5: 1). 使用前请将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀，短暂离心后置于冰上待用。
2).配制各步骤反应液时推荐使用移液器吹打混匀，剧烈振荡可能会造成文库产出下降。
3).为避免样品交叉污染，推荐使用带滤芯的枪头，吸取不同样品时请更换枪头。
4).推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应，使用前应预热PCR仪至反应温度附近。
5).PCR产物因操作不当极容易产生气溶胶污染，进而影响实验结果准确性。因此，我们推荐将PCR反应体系配制区和PCR产物纯化检测区进行强制性的物理隔离；使用专用的移液器等设备；并定时对各实验区域进行清洁(使用0.5%次氯酸钠或10%漂白剂进行擦拭清理)，以保证实验环境的洁净度。
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