VAMNE MagUltra FFPE DNA Extraction Kit
磁珠法FFPE DNA提取试剂盒
破译FFPE样本DNA，为肿瘤研究保驾护航
PCR；二代测序；杂交捕获等
本试剂盒采用安全无毒的环保脱蜡剂和高效的裂解、解交联试剂，能够裂解释放石蜡包埋切片及组织中的微量DNA。试剂盒中使用的高亲和力磁珠可在高盐缓冲液作用下吸附核酸，在低盐洗脱液作用下释放核酸，从而达到快速分离纯化核酸的目的。所得产物质量稳定，完整性和可扩增性好，可用于PCR、二代测序和杂交捕获等下游应用。本试剂盒可与自动化核酸提取仪配套使用进行高通量提取。
安全无毒：使用环保无毒的脱蜡剂代替传统有毒的二甲苯进行脱蜡
量高质优：提取产物产量高、纯度优，对下游无抑制，提取效果稳定可靠
1.兼容多样本低起始量投入
使用Vazyme #DM601＆DM602与Supplier A - E提取大小一致且连续的小鼠肺脏、肝脏、脾脏石蜡切片（均1片，约30 mm2），用Qubit检测提取产物浓度（图1）、OneDrop检测纯度（图2），各取12 μl提取产物应用2%琼脂糖凝胶电泳检测基因组完整度（图3）。结果表明：Vazyme #DM601＆DM602可兼容多脏器低起始量石蜡切片，产量高纯度优，基因组完整度较好，且DM602（机提）相较DM601（手提）无DNA产量损失。
图1. DM601＆DM602和Supplier A - E提取30 mm2鼠肺、鼠肝、鼠脾组织投入面积提取产量对比结果
图2. DM601＆DM602和Supplier A - E提取30 mm2鼠肺、鼠肝、鼠脾组织投入面积产物纯度对比结果
图3. DM601＆DM602和Supplier A - E提取30 mm2鼠肺、鼠肝、鼠脾组织投入面积产物胶图对比结果
2.高质提取，下游无忧
使用Vazyme #DM601＆DM602与Supplier A - E提取大小一致且连续的小鼠肺脏、肝脏、脾脏石蜡切片（均1片，约30 mm2），qPCR检测提取产物对下游扩增是否有影响（ΔCt = DM601的Ct值 - DM602及Supplier A - E的Ct值）（图4），提取产物经机械法打断后取100 ng DNA应用Vazyme #ND610进行建库，文库浓度及分析结果如图所示（图5）。结果表明：Vazyme #DM601＆DM602与提取产物，对常见下游实验无抑制，并且可获得高质量的文库数据。
图4. 使用DM601＆DM602和Supplier A - E提取30 mm2鼠肺、鼠肝、鼠脾组织，提取产物qPCR对比结果
图5. DM601＆DM602和Supplier A - E提取30 mm2鼠肺、鼠肝、鼠脾组织，提取产物建库及分析对比结果
BOX 1，2 ~ 8℃保存，根据不同目的地调整运输方式；
BOX 2，15 ~ 25℃保存，室温运输。
Q1：样本投入较多，是否需要在说明书应加入脱蜡液体积的基础上增加用量？
A1：如果样本量过多的话，可以先进行脱蜡步骤，将溶解的蜡液先吸弃一部分，再进行二次脱蜡。若样本量＜8片，不需要额外增加脱蜡液体积，可以尝试适当延长脱蜡时间。
Q2：为什么解交联后下层液体中会有组织颗粒？会影响后续实验吗？
A2：可能存在样本量投入过多或样本自身存在杂质无法溶解，不会影响后续实验。
Q3：脱蜡不充分该怎么处理？
A3：二次脱蜡。
Q4：90℃孵育1小时，会不会导致产物降解？
A4：长时间高温处理会导致DNA一定程度上的降解，1小时是在平衡解交联效果和核酸产量后比较合适的时间。
Q5：90℃孵育时间超过一个小时，会怎么样呢？
A5：产量会降低，且可能会造成片段的损伤（大片段占比降低）。
Q6：56℃孵育1 - 3小时有什么区别？
A6：无太大区别，但样本量过多的情况下推荐进行3小时孵育，增加裂解时间以达到提高产量和促进解交联的目的。
Q7：DM601/DM602试剂盒能提取穿刺样本吗？
A7：可以，直接投入足量的穿刺样本，按照说明书正常操作流程提取。
Q8：DM601/DM602试剂盒可以提取新鲜样本吗？
A8：理论上可以，需控制样本投入量10 mg左右，且不需要解交联过程。
Q9：不使用RNase A，对实验结果影响大吗？
A9：产量及纯度会虚高，RNA的存在会干扰DNA的测量，导致实际DNA投入偏低，而引发其它风险。
Q10：对应试剂中加入乙醇和异丙醇含量偏少？
A10：加入异丙醇的量偏少：产量会略微降低；加入乙醇的量偏少：产量会略微下降，且存在杂质去除不干净导致纯度降低的风险。
Q11：固定液组织投入量超过20 mg会导致裂解不充分吗？
A11：该试剂盒能兼容＜20 mg的组织样本，建议减少投入量。
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