RapidLyse Plasmid Mini Kit
颠覆传统技术，一步上柱，6 min质粒小提
质粒DNA提取；产物可用于酶切；PCR；测序；连接转化
· 技术革新：一步裂解，颠覆传统
· 快速：6 min即可完成提取
· 高产：提取效率高，质粒DNA产量高达35 µg
本试剂盒采用新型的一步裂解技术，仅需6 min即可从1 - 5 ml过夜培养菌液中快速纯化出高质量的质粒DNA。独特的缓冲液配方将SDS碱裂解法中的菌体重悬、裂解及中和三个步骤合并为一步，搭配先进的硅胶膜吸附技术，能高效特异的结合质粒DNA，并有效去除蛋白质、基因组等杂质。洗脱获得的高质量质粒DNA，可直接用于酶切、PCR、测序、转化等分子生物学实验。
1. 一步上柱，快速提取
Vazyme #DC211一步上柱，操作简便，6 min即可完成提取。
图1 质粒提取操作流程对比
2. 高产
分别使用Vazyme #DC211(简称V)与竞品(A、B、C、D、E、F、G、H、I、J)，按照各自流程提取pUC19和pGBKT7质粒，对提取产物进行浓度测定(图2A、B)及跑胶检测(图2C、D)。结果表明，Vazyme #DC211提取出产物的产量以及完整度显著高于快速质粒小提竞品试剂盒（A、B、C），优于或等于普通质粒小提竞品试剂盒（D、E、F、G、H、I、J）。
图2 质粒DNA的检测结果
（其中V、A、B、C是快速质粒小提试剂盒，其余为普通质粒小提试剂盒）
15 ~ 25℃保存
1. 适用提取除大肠杆菌之外的菌体吗？
不适用，用于end A-大肠杆菌
2. DC211提取质粒片段长度的范围？
0-10K，>10K大片段提取产量比普通小提竞品差
3. 测试过的样本类型，投入量以及对应产量？
正常及高拷贝质粒1 - 5 ml菌液投入量，产量约10 - 35 μg
4. 试剂盒若是放在4℃或者-20℃储存（一周或更长时间）对提取效果是否有影响？
无影响
5. 夏季温度偏高，长期在室温下会有什么影响吗？
Buffer QLB(请先检查是否已加入RapidLyse Mix)使用完毕后请立即置于2 ~ 8℃保存，并在四个月内使用完毕；其它组分无影响。
6.产物中有基因组残留如何解决？
若残留较多建议重新提取。
提取过程：1）确保Buffer QLB低温使用，实验开始前请将Buffer QLB在冰上充分预冷；
2）Buffer QLB加入后，确保立即使用涡旋仪进行菌体沉淀的悬浮。
7. DC211试剂盒中DNA吸附柱的最大结合能力是多少？
35 μg
8. DC211质粒小提盒子里的RapidLyse Mix放在室温一个月了，是否还能用？
可以，建议收货后2 ~ 8℃储存，更长期请置于-20℃
9. 提取的DNA纯度低（即OD260/OD230偏低）？
试剂或杂蛋白残留：1）减少菌体投入
2）收集菌体沉淀时尽量吸除上清
3）确保Buffer QLB低温使用
4）Buffer QWB建议沿吸附柱管壁四周加入，盖紧盖子后颠倒混匀2 ~ 3次
5）空管离心时间由原来1 min延长至2 min
10. DC211，DC201，DC203中酶的区别？
1）DC203，DC211中的酶都是mix，同时具有去除RNA和裂解的作用，DC201是单酶，仅有去除RNA的作用；
2）DC203和DC211的酶如果加错到DC201的P1里不会影响提取效率，如果DC201的酶加到DC203或者DC211里都会影响这两个产品的提取效果。
11. 质粒DNA 产量低？
参考说明书常见问题解决方案
从宿主菌中无质粒（避免多次迭代转接导致质粒丢失）、宿主菌类型选择（end A-）、质粒拷贝数（高拷贝载体）、裂解（重悬彻底）及洗脱（保证洗脱效率）、已加入RapidLyse Mix的Buffer QLB性能变化（储存温度不当、或超过有效期导致酶失活，样本投入过多）等因素排查，进而正常提取。
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