ResiDNA Hunter Residual DNA Sample Preparation Kit
快速高效回收残留核酸
CHO细胞来源的各种生物制品样本的前处理
本产品基于独特包埋的超顺磁性硅基磁珠，在独特的缓冲液体系中，通过氢键和静电吸附核酸，可稳定高效地提取生物制品样本中残留的微量宿主细胞DNA，适用于CHO细胞来源的各种生物制品样本的前处理。本试剂盒可搭配ResiDNA Precise Quantitative CHO DNA Detection Kit(Vazyme #RD102)使用，对生物制品中宿主细胞残留DNA进行定量检测。
· 简便快速：操作简便，手动提取单个样本＜1.5 h
· 稳定高效：可稳定高效地提取生物制品样本中残留的微量宿主细胞DNA
1. 简单快速
Vazyme #RD101操作简便，手动提取单个样本＜1.5 h。
图1 RD101操作流程概要
2. 稳定高效
A.使用Vazyme #RD101（简称V）与 supplier A 宿主细胞残留DNA提取试剂盒，对不同核酸浓度的样本进行回收。采用相同定量试剂盒（Vazyme #RD102）进行检测，Vazyme #RD101的回收率均优于supplier A，精密度（RSD）＜15%（图2）。
图2 不同提取试剂盒的提取回收率、精密度
B.分别使用Vazyme、supplier A、supplier B的整套“提取＋检测”方案，对不同核酸浓度的样本进行回收检测，Vazyme整套解决方案均优于supplier A、supplier B（图3）。
图3 不同品牌的搭配提取回收率
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组分 |
RD101-01(100 rxns) |
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结合缓冲液 |
40 ml |
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Proteinase K缓冲液 |
10 ml |
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漂洗液 |
20 ml |
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洗脱液 |
10 ml |
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磁珠 |
10 ml |
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Proteinase K |
2 × 750 μl |
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糖原 |
2 × 500 μl |
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酵母tRNA |
50 μl |
Proteinase K、糖原、酵母tRNA：-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输；
其它组分：15 ~ 25℃保存，室温运输。
1、样本回收率偏低
1）样本pH值过酸或过碱：可用1 M NaOH或1 M HCl调整样本pH值至中性
2）样本蛋白含量过高：可适当延长样本消化时间
3）磁珠未混匀：磁珠在使用前充分混匀
4）漂洗液中未加入无水乙醇：在首次使用前按照试剂瓶标签信息加入指定体积无水乙醇
5）裂解结合和漂洗过程中磁珠损失：可延长磁力架磁吸时间，待液体完全澄清后再弃液
6）最后一步洗涤弃液后有醇残留：可用10 μl小枪头吸净残留液体
7）磁珠干燥时间过长：磁珠干燥时间不宜超过3 min
8）洗脱时未保证磁珠均瞬时离心至管底：可在70℃孵育前保证洗脱液和磁珠均在管底
9）磁珠残留：可延长洗脱后离心时间，轻拿离心管
2、样本回收率偏高
样本间交叉污染：建议从低浓度到高浓度样本依次开盖处理，操作完成后确保离心管盖紧
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