VAHTS TGS DNA Library Prep Kit for ONT
ONT三代DNA建库试剂盒
ONT TGS快速DNA建库试剂盒
DNA建库；三代建库；TGS建库；Nanopore测序；ONT测序
VAHTS TGS DNA Library Prep Kit for ONT是一款基于连接法的文库构建试剂盒，适用于Nanopore纳米孔测序平台，结合Barcode Adapter可对100 ng - 1.5 μg的gDNA以及扩增子进行单样本或多样本建库。本试剂盒选用定向进化的高催化活性突变体酶，搭配精心优化的缓冲Buffer，可在末端修复/损伤修复/加A尾后无需纯化，直接进行Barcode Ligation，实验流程便捷。试剂盒中提供的所有试剂都经过了严格的质量控制和功能验证，可保证文库构建的稳定性和重复性。
1）操作流程简便： 末端修复+损伤修复+加A尾一管完成，无需纯化，可直接进行Barcode连接
2）建库耗时缩短：全流程建库耗时最短可＜2h，较常规流程节省时长≥30min
3）兼容物种多样：可兼容动物、植物、微生物等多物种
4）数据质量优异：长片段读取率高、数据产出高、数据质量好
将人血、水稻、金黄色葡萄球菌的gDNA质控后作为模板，分别通过Vazyme #TS201和友商同类产品构建DNA文库，Nanopore高通量平台测序，比较不同建库试剂的性能。
1）更优的数据产出与质量
2）更高的长片段读取率
如图所示，相比于友商同类产品，Vazyme #TS201具有更优的下机数据产出/质量、更高的长片段读取率。
-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。
Q1：洗脱得率偏低
A1：① 磁珠使用体积少，存在吸取误差。建议Barcode Ligation之后，加入Nuclease-free ddH2O补足至50 μl，吸取20 μl VAHTS DNA Clean Beads (0.4 ×)进行纯化操作；
② 可能由于孵育过程中磁珠聚集下沉所致，可在垂直混匀仪上孵育。但垂直混匀仪的转速不可过高，建议20 - 30 rpm。
Q2： 下机数据量偏低
A2：① 修复时间不足，可适当延长修复时间；
② 连接效率较低，可能由于时间不足所致，建议适当延长连接时间；也可能是Barcode Adapter浓度不足，建议适当增加Barcode Adapter浓度。
Q3： N50和N90长度偏短
A3：① 可能由于模板本身的小片段偏多，或模板打断长度偏短所致；建议建库前进行目的长度片段筛选；
② 可能建库过程中存在剧烈振荡，导致长片段断裂，小片段增多；建议建库时避免涡旋振
荡，可使用移液器轻轻吸打10次以上混匀。
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