Super FastPure Cell RNA Isolation Kit
5 min加速提取,出数据不再等待!
RNA提取,产物可用于RT-PCR、qRT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译和高通量测序等分子生物学实验
Super FastPure Cell RNA Isolation Kit为超快速单柱法动物细胞Total RNA提取试剂盒,全程仅需5 min。试剂盒基于硅胶膜纯化技术,搭配专有的裂解Buffer,有效破碎细胞膜而对核膜的损伤较弱,基因组释放少,无需额外去除操作,得到的Total RNA产量高、完整度高、纯度高、无蛋白和其它杂质污染,可直接用于RT-PCR、qRT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译和高通量测序等分子生物学实验。
操作简化,超快速:5 min极速提取,裂解上柱一步到位
安全无毒,无肝胃损伤更放心:无需β-巯基乙醇、酚氯仿等有毒试剂
样本起始量要求低:支持96孔板单个孔及1x104个细胞RNA提取
1.简单快速
Vazyme #RC102操作简便,常温操作5 min即可完成。
图1. RC102操作流程概要
2.适用性广
使用Vazyme #RC102对不同类型培养细胞进行RNA提取,并将产物进行琼脂糖凝胶电泳检测(图2-1),结果表明Vazyme #RC102对各种细胞样本均具有广泛的兼容性。
图2-1. 不同样本提取产物电泳图
图2-2. 不同培养细胞RNA产量
3.量高质优
使用Vazyme #RC102与市场上同类产品Supplier A、B、C、D,按照各自说明书同时提取3×106个293细胞、1×106个BV2细胞,2×106个PBMC细胞和96孔板单孔Hela细胞总RNA,进行浓度测定和琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明,Vazyme #RC102提取的RNA产量、纯度和完整性均较好,且无基因组和蛋白残留(图3)。
图3. 不同产品RNA产量和完整度比对结果
(Supplier A存在较严重gDNA和蛋白残留,导致浓度测值偏高)
15 ~ 25℃保存,室温运输。
Q1:样本裂解后能否离心取上清,再过RNA柱?
A1:不能,裂解产物需全部转移上柱。离心取上清会导致RNA丢失在沉淀中,降低提取产量,因此切勿进行离心取上清步骤。
Q2:未提取到RNA或RNA产量低?
A2:① 样本投入量过低或样本本身RNA含量低,可增加样本投入量进行提取;
② 细胞裂解不够充分,需涡旋振荡至无明显细胞团块或增加吹打次数至细胞完全脱落充分裂解;
③ 上柱前切勿进行离心取上清操作,否则会丢失RNA。
Q3:提取的RNA纯度低(即OD260/OD230偏低)?
A3:① 杂质残留:a. 增加Buffer RW漂洗次数;b. 漂洗后尽可能使吸附柱上残留的醇充分挥发;
②产量过低会导致OD260/OD230偏低,按说明书推荐投入量和操作方式提取,尽可能提高产量。
Q4:有gDNA残留?
A4:① 样本状态差(如转染后的细胞),可用Vazyme #RH104-C1膜上消化产品进行gDNA去除;
② 细胞核酸含量高,投入量过多,适当减少样本投入量。
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