Protein A/G Magnetic IP/Co-IP Kit
免疫(共)沉淀试剂盒(Protein A/G磁珠法)
一盒在手，省心省力做免疫沉淀
IP、Co-IP和非还原条件下的免疫沉淀实验
Protein A/G Magnetic IP/Co-IP Kit包含高性能的Protein A/G磁珠及经过优化的缓冲溶液，提供良好的反应条件和稳定性，能高效、快速完成目的蛋白的免疫沉淀(IP)和免疫共沉淀(Co-IP)实验。其核心组分Protein A/G磁珠为亲水超顺磁性聚苯乙烯微球与高纯度的Protein A/G共价结合而成，磁珠粒径为1 μm，重组Protein A/G包含Protein A的5个免疫球蛋白结合域和Protein G的2个免疫球蛋白结合域，结合能力较Protein A或Protein G更强。本试剂盒支持变性或酸性洗脱，以适应不同实验需求。
高效稳定：操作便捷、反应体系稳定
免疫沉淀效率高：蛋白富集能力强且特异性高
样本兼容性广：适用于细胞、组织、菌液等多种样本
1）免疫沉淀效率高
以Supplier A为参照，在相同实验条件下对多个蛋白进行免疫沉淀实验，结果表明Vazyme #PB201免疫沉淀效率高，蛋白富集能力和特异性均优于Supplier A。
2）样本兼容性广
以Supplier A为参照，在相同实验条件下对不同样本的多个蛋白进行免疫沉淀实验，结果表明Vazyme #PB201可兼容细胞、组织、菌液等不同样本条件下的免疫沉淀实验。
BOX 1：2 ~ 8℃保存，冰袋运输。
BOX 2：-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。
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Q1：该试剂盒内Lysis/Wash Buffer内是否含有蛋白酶抑制剂等组分
A1：不包含，需要根据实验安排自行添加蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂等组分
Q2：SDS-PAGE Sample Loading Buffer (5×)如何稀释到1×
A2：推荐用水或PBS按比例稀释到1×
Q3：磁珠使用前聚团，无法吹散
A3：（1）1 ml枪头接近磁珠底部进行吹打混匀；
（2）将EP管置于磁力架上15 sec，取下后在最大涡旋转速下进行涡旋混匀；
（3）超声波水浴处理2 min，再振荡混匀。
Q4：免疫沉淀过程中磁珠聚团，无法吹散
A4：（1）保证样本充分裂解和离心，无絮状物或蛋白沉淀；
（2）在中性条件下进行实验，若样本偏酸、偏碱或经药物处理过，将样本稀释后再使用；
（3）实验过程使用同一种缓冲液，避免缓冲液不兼容。
Q5：IP组和lgG组出现非特异性条带
A5：（1）抗体浓度过高：检测抗体说明书推荐量，适量降低抗体使用量；
（2）抗体特异性不好：使用特异性高的抗体；
（3）样本降解：确定样本是否加入蛋白酶抑制剂，是否新鲜；
（4）样本里面蛋白丰富，磁珠对样本进行预清除。
Q6：lgG组有目的蛋白条带
A6：（1）明确分子量是否在轻重链位置；
（2）保持对照IgG浓度和IP组抗体浓度一致；
（3）高浓度蛋白与磁珠发生非特异性结合：磁珠用1%BSA封闭1h。
Q7：如何增加Acid Elution Buffer洗脱效率？
A7：（1）将静置9 min改为每3 min 振荡混匀一次，共振荡3次；
（2）延长洗脱液孵育时间。
Q8：目的蛋白受到轻重链干扰怎么办？
A8：（1）使用Vazyme #RA1008和#RA1009空间构象特异性二抗，避开轻重链的干扰；
（2）使用不同种属的IP抗体和Western blot一抗进行实验，避开轻重链的干扰。
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